طراحی و ساخت وکتورهای مناسب برای انتقال و بیان ژن igf-1 انسانی در گیاه ذرت

اخیرا" دیابت وابسته به انسولین سومین عامل بزرگ مرگ ومیر درکشورهای صنعتی بعد از بیماری های قلبی عروقی و سرطان شده است. تزریق انسولین و یا پروتئین های شبه انسولین از قبیل igf-1، مهمترین روش درمان این بیماری محسوب می شود. با توجه به روند افزایشی این بیماری، روش های متداول جوابگوی نیاز روز افزون به این نوع پروتئین ها نخواهد بود. بنابراین، توسعه تکنیک های جدید برای تولید این پروتئین ها در سطوح بالاتر و با کیفیت بیشتر از اهمیت بالایی برخوردار است. در حال حاضر، این پروتئین ها بیشتر در سیستم های باکتریایی و مخمر تولید می شوند، ولی به دلیل مشکلاتی که این سیستم ها دارند و همینطور برای ایمنی بیشتر و تولید با ظرفیت بالا، استفاده از سیستم های گیاهی توصیه می شود. بنابراین، هدف از انجام این تحقیق، طراحی و ساخت وکتورهای مناسب برای انتقال cdna ی ژن igf-1 جداسازی شده از سلول های انسانی در گیاه ذرت بعنوان یک گیاه زراعی مهم با عملکرد بالا می باشد. برای این کار، ابتدا cdna ی ژن igf-1 که قبلا از سلول های انسانی جداسازی و کلون شده بود، با استفاده از آنزیم های برشی smai و sphiدروکتور pff19g و در بین پروموتور و ترمیناتور35s کلون گردید. با درج کاست ژن manaبعنوان ژن گزینشگر مناسب برای ذرت، وکتور نوترکیب psd3 ساخته شده که برای انتقال و بیان این ژن در ذرت قابل استفاده خواهد بود. همچنین با توجه به اهمیت کشت بافت برای انتقال موفق و پایدار ژن، در این تحقیق کشت بافت ذرت با استفاده از قطعات برگ گیاهچه های استریل ذرت برای اولین بار در ایران بهینه سازی و پس از تولید کالوس های جنین زا و تکثیر آن ها، باززایی در سطح گیاهچه و ریشه زایی با موفقیت انجام گرفت.